**大学临床医学院医学检验系 临床生物化学检验技术实验报告

　 姓名 **

　学号 2016141624108

　 得分

　 教师签名

　 干扰试验 一、实验目的 掌握：干扰试验的原理及意义 熟悉：干扰试验的操作过程 了解：干扰试验在临床中的应用价值 二、实验原理 干扰试验可反映分析物以外其他物质对分析方法测定分析物准确度的影响，可测定特异性和干扰二者引起的误差。

　本试验采用抗坏血酸作为GOD-POD法测定血糖的干扰物质。抗坏血酸可以和GOD反应生成的H2O2发生还原反应，影响H2O2参与第二部POD的偶联反应，从而降低显色强度产生分析误差。

　三、实验试剂与器材 1、样本：血糖浓度约7mmol/L的人血清（浆）标本或者混合血清（浆） 2、250mg/L、500mg/L、750mg/维C溶液：

　取0.075g维C，烧杯中溶解，转移至100ml容量瓶，定容，配成750mg/L溶液。取1ml的750mg/L维C溶液至烧杯，加0.5ml蒸馏水配制成500mg/L维C溶液。取1ml的750mg/L维C溶液至烧杯，加1ml蒸馏水配制成250mg/L维C溶液。

　3、生理盐水（可用蒸馏水替代） 4、GOD-POD血糖检测试剂盒 四、实验步骤 1、标本制备 加入物ml 基础管 干扰管 I II III 血清 0.9 0.9 0.9 0.9 抗坏血酸溶液 — 0.1ml750mg/l 0.1ml500mg/L 0.1ml250mg/L 生理盐水 0.1 — — — 2、GOD-POD法测定血糖浓度：按GOD-POD试剂盒说明分别测定基础管及干扰管的血糖浓度，每管做双份检测，结果取平均值。

　加入物ml 空白管 标准管 测定管 蒸馏水 0.02 — — 葡萄糖标准应用液 — 0.02 — 血清 — — 0.02 酶酚混合试剂 3.0 3.0 3.0 混匀，置37摄氏度水浴20分钟，在波长505nm处比色，以空白管调零，读取标准管及测定管吸光度。

　3、计算 血清浆葡萄糖（mmol/L）=测定管吸光度x5.55标准管吸光度 干扰物加入浓度（mmol/L）=干扰物溶液浓度x干扰物溶液量（血清量+干扰物溶液量+生理盐水量） 干扰值（mmol/L）=干扰管测定值—基础管测定值 干扰率%=干扰值/基础值x100%

　标准管 基础管 干扰管 I II III A 0.212 0.379 0.283 0.286 0.289 C

　9.92 7.41 7.49 7.57 干扰物加入浓度

　 75 50 25 干扰值

　 -2.51 -2.43 -2.35 干扰率

　 -25.30% -24.49% -23.69% 干扰管干扰率大于1/4Tea（0.33mmol/L或10%） CLIA’88能力比对试验的质量要求规定，表明干扰物引起的偏差会影响测定结果的临床应用价值。

　六、实验讨论 1、实验结果讨论与改进：

　随着干扰物浓度的增加，对葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖干扰越大（见原理），显色强度越低，吸光度越低，导致血糖浓度越来越低，干扰值越来越大，干扰率越来越大。

　本试验中，加入可疑干扰物浓度均高于影响测定结果的临床应用价值的最低值，可以增加更多更细的浓度，如200mg/L、175mg/L、150mg/L…… 本次试验只加入了维生素C作为干扰物，在实际应用中，分析方法的干扰物不只一个，一定浓度的尿酸也可影响血糖的测定，而干扰物也可对多种分析方法造成干扰，因此应对造成临床影响的多种干扰物进行干扰试验的评价，可增加相同或不同浓度的尿酸作为干扰物。

　试验中存在多种误差，判定误差来源于方法的特异性差还是属于干扰，可用维生素C纯溶液作为样本测定，如果存在干扰值，则误差属于方法的特异性差。

　2、进行干扰试验时，首先需要确定被试可疑物质是否可引起误差；若能引起误差，还需进一步探讨其误差的来源是属于因方法特异性差，还是属于干扰，若加入的物质本身和分析试剂反应并产生读数，说明方法特异性差；若加入物质并不与分析试剂反应，但它改变了分析物和分析试剂间的反应，说明存在干扰。

　3、干扰试验与回收试验的区别与共同点是什么？ 区别：回收试验对试验结果产生影响的是分析物浓度。干扰试验对试验结果产生影响的是干扰物浓度。

　共同点：都是方法评价试验，通过相关试验对其各种误差及总误差进行分析，并与性能标准进行比较，判断其准确度是否可以接受。