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血浆B细胞趋化因子1和干细胞因子水平与HBV感染患者临床指标的关系
2023-03-29 16:30:04 ℃亢必勃,赵 绒,赵 杨,申焕君,陈朝霞,周 云,范 超*
空军军医大学第二附属医院 1.感染科; 2.检验科, 陕西 西安 710038
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)在中国具有较高的感染率,是危害中国卫生安全的重要问题。近年来的乙型肝炎流行病学研究数据显示,全球约有3.5亿例HBV感染者,而每年因HBV感染及相关的肝硬化、肝癌等疾病死亡的人数超过60万[1-2]。既往研究发现,干细胞因子(stem cell factor, SCF)可促进骨髓来源的干细胞分化,这些细胞可在肝脏内分化为卵圆细胞和肝脏前体细胞,这些细胞作为肝干细胞可进一步诱导肝细胞的增殖和肝脏的再生[3]。研究发现,SCF与慢性乙型肝炎肝纤维化、重症肝炎、肝癌等均存在相关性[3-4]。B细胞趋化因子1(B cell-attracting chemokine 1, BCA-1)对前B细胞具有强趋化作用,可介导成熟B淋巴细胞游走和归巢,与肝癌的发生具有一定的相关性[5-6]。其在乙型肝炎中的作用也有一些研究[7]。但是,HBV感染者血清SCF和BCA-1的水平变化,以及它们与抗病毒免疫应答指标之间的关系尚不清楚。谷丙转氨酶(alamine transferase, ALT)、谷草转氨酶(aspartate transamin-ase, AST)、乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA) 含量,乙型肝炎病毒E抗原(HBeAg)水平、乙型肝炎病毒E抗体(anti-HBe)及肝纤维化程度等是反映肝脏状况的常用临床指标[8-9],本研究收集并整理了HBV感染患者ALT、AST、HBV-DNA及HBeAg等相关数据,并比较了这些指标与SCF和BCA-1之间的相互关系,为进一步了解HBV感染机制提供实验依据。
1.1 材料
1.1.1 病例:收集2019年3月至2019年10月空军军医大学第二附属医院收治的HBV感染者样本147例。另选取2019年3月至2021年3月本院门诊健康者样本51例为对照样本。所有纳入样本均符合《慢性乙型肝炎防治指南(2019更新版)》[10]的诊断标准。样本排除标准包括:甲型肝炎、丙型肝炎、戊型肝炎、自身免疫性肝病、肝癌等其他类型肝脏疾病;
合并恶性肿瘤;
妊娠或哺乳期妇女。研究通过伦理委员会批准并签署知情同意书(TDLL-2016139)。
1.1.2 试剂:BCA-1检测试剂盒(BCA-1 Human ELISA Kit)及SCF检测试剂盒(SCF Human ELISA Kit)(Thermo Fisher Scientific公司)。
1.2 方法
1.2.1 标本的采集:HBV感染者和对照者的样本取自空军军医大学第二附属医院传染科收治患者和体检者。采集患者早晨空腹静脉血,样本于2 h内300×g离心10 min),离心后收集上层血清并进行分装,于-80 ℃冰箱中保存。
1.2.2 ELISA检测血清BCA-1和SCF:通过ELISA法对BCA-1和SCF含量进行检测,检测步骤严格按照ELISA试剂盒说明书进行。
1.2.3 血清指标的检测:使用全自动生化分析仪检测。
1.3 统计学分析
2.1 患者临床资料分析
共纳入HBV感染者147例,健康对照者51例,各组间性别及年龄差异无统计学意义。HBV感染者ALT、AST较健康者明显升高(P<0.001)(表1)。
表1 HBV感染者及健康者的临床资料分析Table 1 Analysis of clinical data from healthy donors and HBV infected
2.2 HBV感染者血清SCF水平的检测和组间差异分析
HBV感染者血清SCF水平明显高于对照组(P<0.001);
SCF血清水平在ALT、AST、HBV-DNA、AFP及HBeAg相关分组间无明显差异;
而肝硬化患者血清SCF水平高于非肝硬化患者(P<0.01)(表2)。
表2 SCF在HBV感染者及各分组中的水平差异分析
2.3 HBV感染者血清BCA-1水平的检测和组间差异分析
HBV感染者组血清BCA-1水平高于对照组(P<0.001)。在HBV感染者中,HBV-DNA阳性患者BCA-1水平显著高于HBV-DNA阴性患者(P<0.05);
AFP异常患者BCA-1水平显著低于AFP正常患者(P<0.05)(表3)。
2.4 SCF、BCA-1与临床指标的相关性分析
HBV感染者血清SCF水平与ALT、 AST、 HBV-DNA和eAg等指标间无显著相关性。但另一方面,BCA-1与HBV-DNA、HBeAg均存在正相关(P<0.01,R=0.314;R=0.456),提示BCA-1可能参与了HBV感染免疫应答过程(表4)。
表3 BCA-1在HBV感染者及各分组中的水平差异分析
在乙型肝炎病毒感染过程中,病毒感染诱导的肝损伤促使肝细胞增殖,对肝组织进行修复,大量的生长因子和细胞因子参与这种肝再生过程[11-12]。SCF在肝脏受损时表达水平明显升高,并诱导骨髓来源的干细胞分化为肝脏卵圆细胞,并促进卵圆细胞增殖发育[3]。SCF基因缺陷小鼠在肝脏部分切除后再生速度明显降低,而将SCF注射到SCF基因缺陷鼠体内可恢复肝脏再生能力,提示SCF在肝再生过程中有重要作用[13]。BCA-1作为B细胞的重要趋化因子和B细胞分化的促进因子,是机体抗病毒免疫应答,尤其是体液免疫的重要指标。有研究发现,BCA-1水平与癌的发生相关,在肝癌、肝硬化的诊断和治疗中也有重要的意义[14-15]。因此,SCF和BCA-1可在一定程度上反映机体肝组织再生和抗病毒活动。本研究结果显示,HBV感染者血清SCF水平明显高于对照组,提示乙型肝炎病毒感染诱导了肝细胞再生和组织修复过程。同时,BCA-1在HBV感染者血清中的水平也显著高于对照组,从侧面反映出机体对抗病毒感染的免疫应答反应。然而,实验并未发现SCF和BCA-1之间的相关性,提示SCF和BCA-1参与HBV感染免疫的作用并不相同。
表4 HBV感染者SCF、BCA-1与常用临床指标间的相关性分析Table 4 Correlation between SCF, BCA-1 and clinical indexes in HBV infected patients
值得注意的是,在HBV感染者的分组比较中,SCF血清水平不仅在HBV-DNA阳性和阴性患者组间存在差异,而且在肝硬化患者中也异常升高,提示SCF可能参与了肝硬化的病理过程。另一方面,BCA-1与HBV-DNA水平密切相关,不仅在HBV-DNA阳性和阴性组之间存在差异,而且两者间存在明显相关性。同时,BCA-1与HBeAg也存在相关性,这可能与BCA-1在B细胞发育和抗体生成过程发挥重要作用有关,其中的内在机制值得关注并做更深入的研究。
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