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白及与其4种常见混伪品的理化比较鉴别
2023-02-02 19:05:08 ℃殷根深 廖莹莹 苏 源 殷左句
1.昆明学院农学与生命科学学院,云南 昆明 650214;
2.湘潭市第六人民医院门急诊部,湖南 湘潭 411102
2020版《中国药典》记载,中药白及为兰科白及属植物白及Bletillastriata(Thunb.)Reichb. f.的干燥块茎,其性味苦、甘、涩、微寒,归肺、肝、胃经,具有收敛止血、消肿生肌的功效,主要用于咯血、吐血、外伤出血、疮疡肿毒、皮肤皲裂等[1],其主要药效成分含有白及胶及白及多糖[2]。近年来,白及在医药、保健、美容等领域得到广泛应用,价格一度居高不下,导致其资源短缺,混伪品大量进入市场[3]。据彭翠仙和向建英的调查,仅云南一省就发现有小白及[B.formosana(Hayata) Schltr.]、黄花白及(B.ochraceaSchltr.)、苞舌兰(SpathoglottispubescensLindl.)、筒瓣兰(AnthogoniumgracileLindl.)、独蒜兰[Pleionebulbocodioides(Franch.) Rolfe]、云南独蒜兰[P.yunnanensis(Rolfe) Rolfe,独蒜兰和云南独蒜兰在云南习称“冰球子”]、紫花美冠兰[Eulophiaspectabilis(Dennst.) Suresh]、毛梗兰[Eriodesbarbata(Lindl.) Rolfe](紫花美冠兰和毛梗兰又称“水白及”)、杜鹃兰[Cremastraappendiculata(D.Don) Makino,云南习称“山慈菇”]、滇黄精(PolygonatumkingianumColl.et Hemsl.)等10种混伪品。鞠康等人的调查结果表明,安徽的白及混伪品也有10种,除和云南市场上共有的几种之外,华白及[B.sinensis(Rolf) Schltr.]、天麻(GastrodiaelataBl.)、二叶舌唇兰(PlatantherachloranthaCust.ex Rchb.)也被当成白及使用[4]。此外,地宝兰[Geodorumdensiflorum(Lam.) Schltr.]在广西[5]、知母(Anemarrhenaasphodeloides Bunge)在贵州[6]、玉竹[Polygonatumodoratum(Mill.) Druce]在四川等地[7]也被当成白及而大量使用。这些混伪品在药性、药效上与白及存在较大差异。因小白及、滇黄精、山慈菇、玉竹在外观性状上与白及相似,容易混淆,在市场上冒充白及被大量使用[8]。其中小白及来源于白及同属植物的干燥块茎,在云南、甘肃、四川等地为地方习用品[8];
山慈菇为兰科杜鹃兰属杜鹃兰的干燥假鳞茎,具有清热解毒、化痰散结的功效[1];
玉竹是百合科黄精属玉竹的干燥块茎,有养阴润燥、生津止渴的功效[1];
滇黄精为百合科黄精属的干燥块茎,有补气养阴、健脾、润肺、益肾的功效[1]。当前,对中药混伪品的鉴别主要有性状鉴别、理化鉴别、显微鉴别等,其中基于各种中药处理方式(如:粉末、水浸液、乙醇提取液)的理化鉴别(如:碱性酒石酸铜反应、茚三酮反应)可以通过化学试剂作用于中药成分而较为直接和准确,并成熟的运用于各种中药与其混伪品的鉴别上(如:柴胡[9]、大黄[10]等),但是还暂不清楚白及与其混伪品的鉴别效果如何。为保证白及用药的准确性和有效性,本研究将白及与其4种常见混伪品在理化试验上进行了鉴定研究。
1.1 仪器 AL204电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司),HHS216电热恒温水浴锅(江苏常熟医疗器械厂),AF-04A中药粉碎机(奥力中药机械有限公司),Mixer 4K涡旋混合器(生工生物工程股份有限公司)。
1.2 材料 试剂有碱性酒石酸铜试剂、2%茚三酮试剂、95%乙醇溶液,均由分析纯试剂(生工生物工程股份有限公司)配制而成。
1.3 试药 白及、小白及、山慈菇、玉竹、黄精均购自于昆明螺蛳湾中药材市场,经湘潭市第六人民医院门急诊部主治医生殷左句鉴定为白及[Bletillastriata(Thunb.) Reichb.f.]、小白及[B.formosana(Hayata) Schltr.]、山慈菇[Cremastraappendiculata(D.Don) Makino]、玉竹[Polygonatumodoratum(Mill.) Druce]、黄精(PolygonatumkingianumColl.et Hemsl.)。
2.1 基于药品粗粉的理化鉴别 将干燥的5种药品用中药粉碎机打碎成粉,粗粉备用,分别进行泡沫试验和碱性酒石酸铜反应。
2.1.1 泡沫试验 各取药品粗粉1 g,加到15 mm×180 mm的试管中,再加入5 mL蒸馏水,塞上试管塞,在涡旋混合器上震荡2 min,观察泡沫产生的情况。由表1可以看出,在泡沫试验中,除了山慈菇的溶液为黄色之外,其余4种并不能进行有效的区分,因此泡沫试验不能对白及与其4种混伪品进行理化鉴别。
2.1.2 药品粗粉的碱性酒石酸铜反应 各取药品粗粉1 g,加到15 mm×180 mm的试管中,加入1 mL蒸馏水,再滴加5~6滴碱性酒石酸铜试剂,在涡旋混合器上震荡10 s,沸水浴中加热5 min后取出,观察反应现象。由表1可以看出,在药品粗粉的碱性酒石酸铜反应中,白及反应后的溶液为蓝黄色,而小白及、山慈菇、玉竹以及黄精4种分别为橙红色、砖红色、黄色、黄色,因此可以根据反应后不同溶液颜色不同这一特点将白及与其余4种区分开。反应后的沉淀除小白及为橙红色、山慈菇为砖红色外,包括白及在内的3种药材的沉淀均为黄色,因此不能根据沉淀区分白及与其混伪品。
表1 基于药品粗粉的白及与其4种混伪品的理化鉴别对比
2.2 基于药材水浸液的理化鉴别 各取药品粗粉1 g,加到15 mm×180 mm的试管中,再加入10 mL蒸馏水,塞上试管塞,在涡旋混合器上震荡2 min,静置30 min后过滤,滤液备用,分别进行茚三酮反应和碱性酒石酸铜反应。
2.2.1 药材水浸液的茚三酮反应 取1 mL滤液,加到15 mm×180 mm的试管中,再加入5~6滴2%茚三酮试剂,摇匀,放入沸水浴中加热5 min后取出,观察反应现象。由表2可以看出,除小白及反应后的溶液为无色透明外,其余4种药材反应后的溶液颜色均为深浅不一的蓝紫色。因此除了能迅速区分白及和小白及以外,并不能很好地将白及与其余3种药材区分开来。
2.2.2 药材水浸液的碱性酒石酸铜反应 取1 mL滤液,加到15 mm×180 mm的试管中,再加入5~6滴碱性酒石酸铜试剂,摇匀,放入沸水浴中加热5 min后取出,观察反应现象。由表2可以看出,除白及反应后的溶液为淡蓝色外,其余其余4种药材反应后的溶液颜色为砖红色至黄色不等。因此依靠药品水浸液的碱性酒石酸铜反应能够迅速区分白及与其4种混伪品。
2.3 基于药材乙醇提取液的的碱性酒石酸铜反应 各取药品粗粉1 g,加到15 mm×180 mm的试管中,再加入10 mL的无水乙醇,塞上试管塞,在涡旋混合器上震荡2 min,静置30 min后过滤,滤液备用。取液1 mL滤液,滴加5~6滴碱性酒石酸铜试剂,摇匀,放入沸水浴中加热5 min后取出,观察反应现象。由表3可以看出,除白及反应后的溶液为墨绿色外,其余其余4种药材反应后的溶液颜色为黄色、砖红色至褐色不等。因此依靠药品乙醇提取液的碱性酒石酸铜反应能够迅速区分白及与其4种混伪品。
表2 基于药品水浸液的白及与其4种混伪品的理化鉴别对比
表3 基于药品乙醇提取液的白及与其4种混伪品的理化鉴别对比
小白及、山慈菇、玉竹、黄精等在云南常被当成白及使用。从科属分类上来说,小白及与山慈菇均为兰科植物,其中小白及与白及为同属植物,仅在花部大小、唇瓣中裂片形状以及假鳞茎大小上有所区别;
山慈菇与白及都属于红门兰亚科(SubFam.Orchidoideae)树兰族(Trib.Epidendreae),具有相似的假鳞茎[11],因此三者在外形上具有较大相似性。百合科黄精属的玉竹和滇黄精,切片后外形和口感都和白及较相似[7],因此这白及与这四者的切片极易造成混淆,但在成分、性味与归经、功能与主治方面有差异,故不能与白及混用。
白及与其混伪品鉴定研究(见翟萌的综述)[7]多以显微特征、薄层色谱、紫外分光、高效液相色谱或分子条形码方式[12]进行,这些方法虽然十分精准,但是存在诸如需要丰富的经验(如显微特征法)或者需要较为高昂的经济成本和较多的时间(如薄层色谱等)的要求。本研究理化试验结果表明小白及、山慈菇、玉竹、黄精与白及在理化特征上存在明显差异,且本研究具有快速、直观和方法易于复制的优点。在基于药材粗粉的理化鉴定中,泡沫试验只能将山慈菇和白及区分开来,但无法明显区分白及与其它3种混伪品,而碱性酒石酸铜反应可以很好地鉴别白及与其4种混伪品;
在基于药材水浸液的理化鉴定中,由于茚三酮反应白及呈蓝色,小白及为白色,有明显差别,可快速鉴别白及和小白及,而碱性酒石酸铜反应中,白及与其余4种混伪品有较明显差异,是较好的理化鉴别方法;
在药材乙醇提取液中,碱性酒石酸铜反应可以迅速地将白及与其4种混伪品者进行区分开来。因此,在白及药材使用过程中,无论是基于粉末、水浸液还是乙醇提取液,碱性酒石酸铜反应是最好的将白及与其混伪品进行快速理化鉴别的方法,可以为保障其用药安全性和有效性提供依据。
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